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遇到前沿峰,該怎么辦?

更新時間:2023-04-25 點擊次數:1336

前沿平緩,后沿陡峭的不對稱色譜峰稱前沿峰。當色譜峰的對稱因子在0.95~1.05為正常峰;小于0.95為前沿峰;大于1.05為拖尾峰。一般情況下,0.9~1.2的色譜峰均可被接受。

在日常的液相色譜分析過程中,前沿峰也是我們經常遇到的色譜圖問題。那今天我們就來學習下,前沿峰的緣由以及該如何應對。

01前沿峰的影響

影響峰高的計算

峰面積相同情況下,由于峰前沿,它們的峰高會相差很多。當我們使用峰高來計算樣品結果時就產生影響,尤其是計算zui低檢出xian時會比較明顯。

影響峰面積的計算

當計算峰面積時,峰的起點和終點一般通過色譜峰的斜率來確定。色譜峰前沿,它的前部基線越平緩起點就越難確認,導致峰面積定量不準。

影響對某些痕量組分的確認

當前面的峰分離度不是很好時,樣品峰就會容易被隱藏在后面峰的前沿處從而無法計算。

02前沿峰原因分析及解決方案

柱過載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量,當樣品量過多時會出現超載現象,包括質量過載和體積過載。我們可通過降低樣品量或者樣品濃度來看峰形是否有所改善。也可增加柱直徑,采用較高容量的固定相來解決。

樣品溶劑選擇不恰當

當樣品溶劑的洗脫能力大大強于流動相時會出現前沿峰。具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,我們通常會得到呈正態分布的峰。當樣品溶液進樣后到達色譜柱的時間比較短,在未被流動相充分稀釋時,由于洗脫能力比較強的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,最終導致峰前延。例如,在反相色譜中用乙腈做樣品溶劑,如果流動相的洗脫力較弱時就會出現前沿峰。我們可以選擇流動相或者接近流動相的比例的試劑作為樣品溶劑。

色譜柱損壞

色譜柱在長時間使用之后就會導致硅膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導致峰前沿。如果排查出是色譜柱損壞,建議直接更換色譜柱。

峰干擾

兩個化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現,色譜峰沒有分開。可通過增加樣品凈化程序,減少干擾。也可調整流動相提高分離度。

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